Efeito de diferentes irrigantes finais na resistência união de um cimento de silicato de cálcio: estudo in vitro / Effect of different final irrigants on the bond strength of a calcium silicate cement : in vitro study

Objetivo: Este estudo teve como objetivo avaliar a resistência de união do cimento Biodentine® à dentina radicular após a utilização de diferentes irrigantes finais. Método: Vinte dentes humanos extraídos tiveram seu terço médio radicular cortado em fatias que foram submersas em hipoclorito de sódio 2,5% e posteriormente divididas aleatoriamente em 4 grupos experimentais (n=15) conforme o irrigante final utilizado (1) água destilada (controle), (2) QMixTM, (3) ácido cítrico 10%, (4) EDTA 17%. Após a imersão na substância teste as amostras foram preenchidas com o cimento Biodentine e imersas em solução salina tamponada com fosfato (PBS) por um período de 7 dias. O teste de push out foi realizado e os valores de resistência de união em Mpa foram obtidos. Os dados foram analisados pelos testes de Kruskal Wallis e Studend- Newman-Keuls. Resultados: Os piores valores de união foram obtidos após a utilização do EDTA enquanto a água destilada, o QMix e o ácido cítrico apresentaram resultados estatisticamente semelhantes entre si. Conclusão: A remoção da smear layer não resultou em melhora nos resultados de união do cimento Biodentine.(AU)

Objective: This study aimed to evaluate the bond strength of Biodentine® cement to root dentin after the use of different final irrigants. Method: Twenty extracted human teeth had their middle root third cut into slices that were submerged in 2.5% sodium hypochlorite and then randomly divided into 4 experimental groups (n=15) according to the final irrigant used (1) distilled water (control), (2) QMixTM, (3) 10% citric acid, (4) 17% EDTA. After immersion in the test substance the samples were filled with Biodentine cement and immersed in phosphate buffered saline (PBS) for a period of 7 days. The push out test was performed and the bond strength values in MPa were obtained. The data were analyzed by Kruskal Wallis and Studend- Newman-Keuls tests. Results: The worst bond values were obtained after using EDTA while distilled water, QMix and citric acid showed statistically similar results to each other. Conclusion: Removal of the smear layer did not result in improved bonding results of Biodentine cement.(AU)

Procedimentos de regeneração pulpar: avaliação longitudinal imune / Procedimentos de regeneração pulpar: avaliação imune / Pulpar regeneration procedures: Longitudinal imune assessment

O tratamento endodôntico em dentes com desenvolvimento radicular incompleto está relacionado a algumas dificuldades e limitações. Entretanto, apesar das dificuldades técnicas, a alta susceptibilidade à fratura de dentes com rizogênese incompleta representa o fator chave para a busca de novas modalidades terapêuticas. Adicionalmente, as deficiências estéticas e funcionais apresentadas pelas terapias reabilitadoras após a perda de um elemento dentário permanente em um paciente jovem, também são fatores importantes e estimuladores. Assim, fica evidente a necessidade de pesquisas que disponibilizem novas opções terapêuticas conservadoras, com resultados previsíveis. O estudo objetivou investigar a resposta imunoinflamatória de dentes submetidos a diferentes protocolos descritos na literatura para se executar a terapia endodôntica regeneradora. Para isso, a expressão de moléculas inflamatórias e fatores de crescimento/diferenciação celular expressos nos tecidos pulpares foram analisados em diferentes intervalos de tempo, utilizando-se um modelo murino desenvolvido para a presente pesquisa. 54 Camundongos Balb/C tiveram as câmaras pulpares de seus molares superiores abertas e, subsequentemente submetidas à pulpectomia. Os animais foram então divididos em 3 grupos: grupo Sangramento (Blood) ­ preenchimento do espaço pulpar com coágulo sanguíneo; grupo EDTA + Sangramento (EDTA + Blood) ­ irrigação dos canais com solução de EDTA a 17% por 1 min, seguido do preenchimento do espaço pulpar com coágulo sanguíneo; grupo Vazio (Empty) ­ espaço pulpar deixado vazio. Cada grupo foi composto por 18 animais. De cada grupo, 6 animais foram sacrificados nos intervalos de 7, 14 e 21 dias após os experimentos. Utilizando-se a análise da reação em cadeia da polimerase em tempo real (Real Time PCR) avaliou-se a expressão gênica das citocinas IL-1, TNF-ß, IL-10 e dos fatores de crescimento/diferenciação NGF, IGF e VEGF, comparando-se tais achados inter e extra-grupos, nos diferentes períodos de avaliação. Os resultados demonstraram as maiores expressões dos mediadores pró-inflamatórios no grupo Empty, assim como uma maior expressão de mediadores anti-inflamatórios no grupo experimental preenchido com o coágulo sanguíneo. O grupo EDTA + Blood evidenciou a maior expressão gênica de fatores de crescimento/diferenciação, em todos os períodos analisados, quando comparado aos demais grupos. Pode-se concluir que a irrigação com solução de EDTA a 17%, previamente ao preenchimento dos sistemas de canais radiculares (SCR) com o scaffold (coágulo sanguíneo), estimulou a expressão aumentada de mediadores relacionados ao sucesso da terapia endodôntica regenerativa. Adicionalmente, o modelo animal desenvolvido para a pesquisa mostrou-se eficaz para se analisar longitudinalmente a modulação imune que se processa nos tecidos pulpoperirradiculares após a instituição da terapia.(AU)

Endodontic treatment in teeth with incomplete root development is related to some difficulties and limitations. However, despite the technical difficulties, the high susceptibility to fracture of teeth with incomplete rhizogenesis represents the key factor for the search for new therapeutic modalities. Additionally, the aesthetic and functional deficits presented by rehabilitation therapies after the loss of a permanent dental element in a young patient are also important and stimulating factors. Thus, it is evident the need for research that offers new conservative therapeutic options, with predictable results. Aimed to investigate the immunoinflammatory response of teeth submitted to different protocols described in the literature to perform the regenerative endodontic therapy. For this, the expression of inflammatory molecules and cell growth/differentiation factors expressed in pulpal tissues were analyzed at different time intervals using a murine model developed for the present study. 54 Balb/C mice had the pulp chambers of their upper molars opened and subsequently submitted to pulpectomy (one tooth per animal). The animals were then divided into 3 groups: Bleeding group - filling of the pulp space with blood clot; EDTA + Bleeding group (EDTA + Blood) - irrigation of the channels with 17% EDTA solution for 1 min, followed by filling of the pulp space with blood clot; Empty - pulp space left empty (negative control). Each group consisted of 18 animals. From each group, 6 animals were sacrificed at 7, 14 and 21 day intervals after the experiments. Using real-time polymerase chain reaction (RT-PCR), the cytokines IL-1, TNF-ß, IL-10 and the growth/differentiation factors NGF, IGF and VEGF, comparing such inter and extra group findings in the different evaluation periods. The results showed the highest expressions of the pro-inflammatory mediators in the Empty group, as well as a greater expression of anti-inflammatory mediators in the Experimental group filled with the blood clot. The EDTA + Blood group evidenced the greater gene expression of growth / differentiation factors, in all periods analyzed, when compared to the other groups. It can be concluded that irrigation with 17% EDTA solution, prior to filling the root canals system with the scaffold (blood clot), stimulated the increased expression of detrimental mediators for the success of regenerative endodontic therapy. Additionally, the animal model developed for the research proved to be effective in longitudinally analyzing the immune modulation that occurs in octopus-periradicular tissues after the institution of therapy.(AU)

Influência do ressecamento da superfície radicular, do tratamento com EDTA e ácido Hialurônico na viabilidade e expressão de citocinas inflamatórias de fibroblastos do ligamento periodontal / Influence of root surface dryness and treatment with EDTA and Hyaluronic acid on the viability and expression of inflammatory cytokines of periodontal ligament fibroblasts

O momento ideal para o reimplante de um dente avulsionado é imediatamente após a avulsão, no entanto, isso nem sempre é possível. Uma série de fatores influenciam na viabilidade das células do ligamento periodontal (PDL) contribuindo para acelerar ou minimizar a ocorrência da reabsorção radicular ou anquilose, consequências mais frequentes dos reimplantes. Um destes fatores é o período extra-oral e o tratamento da superfície radicular. O EDTA (ácido etilenodiamino tetracético) a 17% e o ácido hialurônico (AH) são utilizados para tratar a superfície radicular, visando menor ocorrência de reabsorção inflamatória e por substituição. Sendo assim, os objetivos deste estudo foram: a) avaliar a viabilidade de fibroblastos do ligamento periodontal (PDLF) em contato com discos radiculares submetidos ou não ao ressecamento de superfície por diferentes tempos e tratados com EDTA e/ou AH; b) quantificar as citocinas inflamatórias IL-6, IL-8, IL-1ß e TNF-α expressas por PDLF; c) observar a adesão de PDLF na superfície do discos radiculares tratados. Foram obtidos 108 discos de dentina e cemento da superfície radicular de dentes bovinos, com 4,5 mm de diâmetro, que foram previamente submetidos a dissolução do ligamento periodontal em solução de hipoclorito de sódio 1% por 15 min. Em seguida os discos foram esterilizados em concentrações decrescentes de álcool (100%,90%,80% e 70%). Os espécimes foram submetidos ou não ao ressecamento radicular por 1h ou 24h e tratados com EDTA associado ou não ao ácido hialurônico, colocados em placas de 96 poços onde foram semeadas células de culturas primárias de PDLF, que ficaram em contato com os discos por 48 h. A viabilidade celular na superfície dos discos foi avaliada através do ensaio de XTT. A microscopia eletrônica de varredura foi utilizada para verificar a adesão de PDLF à superfície dos discos. A detecção e quantificação das citocinas foi realizada pelo teste ELISA. Os dados foram submetidos à análise estatística pelo teste ANOVA e Tukey (p < 0,05). A maior média foi apresentada no grupo sem ressecamento para o tratamento EDTA+AH (148,39), que diferiu significativamente dos grupos controle e EDTA. No grupo ressecamento 1 h EDTA+AH (144,91) foi diferente dos demais. Para ressecamento 24h, verificou-se que o grupo EDTA+AH diferiu do grupo controle. Não houve modificações na expressão das citocinas IL-6, IL-8, IL-1ß e TNF-α quando foi acrescentado os tratamentos propostos. A IL-6 mostrou uma diminuição quando em contato com AH no periodo de 24h. Foi observada pelo MEV adesão de PDLF na superfície de todos os discos tratados e em todos os períodos analisados. Conclui-se que o ácido hialurônico é uma alternativa de tratamento para casos de dentes avulsionados já que mostrou seu papel promovendo adesão e aumento da viabilidade(AU)

The ideal time for reimplantation of an avulsed tooth is immediately after avulsion, however, this is not always possible. A number of factors influence the viability of the cells of the periodontal ligament (PDL) contributing to accelerate or minimize the occurrence of root resorption or ankylosis, more frequent consequences of reimplantation. One of these factors is the extra-oral period and root surface treatment. EDTA (17% ethylenediaminetetraacetic acid) and hyaluronic acid (HA) are used to treat the root surface, aiming for a lower occurrence of inflammatory resorption and replacement. Thus, the objectives of this study were: a) to evaluate the viability of periodontal ligament fibroblasts (PDLF) in contact with root disks submitted to surface dryness at different times and treated with EDTA and / or AH; b) quantify the inflammatory cytokines IL-6, IL-8, IL-1ß and TNF-α expressed by PDLF; c) observe the adhesion of PDLF on the surface of the treated root discs. 108 dentin and cementum disks were obtained from the root surface of bovine teeth, 4.5 mm in diameter, which were previously submitted to dissolution of the periodontal ligament in 1% sodium hypochlorite solution for 15 min. Then the disks were sterilized in decreasing concentrations of alcohol (100%, 90%, 80% and 70%). The specimens were submitted to root resection for 1 h or 24 h and treated with EDTA, whether or not associated with hyaluronic acid, placed in 96-well plates where cells from PDLF primary cultures were seeded and left in contact with the discs for 48 h. Cell viability at disc surfaces was assessed by the XTT assay. Scanning electron microscopy was used to verify the adhesion of PDLF to the disc surface. Detection and quantification of cytokines was performed by ELISA. Data were submitted to statistical analysis by the ANOVA and Tukey test (p <0.05). The highest mean was presented in the non-dry group for EDTA + AH treatment (148,39), which differed significantly from the control and EDTA groups. In the dryness group 1 h EDTA + AH (144.91) was different from the others. For dryness 24 h, it was found that the EDTA + AH group differed from the control group. There were no changes in the expression of cytokines IL-6, IL-8, IL-1ß and TNFα when the proposed treatments were added. IL-6 showed a decrease when in contact with HA in the 24-hour period. It was observed by the MEV adhesion of PDLF on the surface of all treated discs and in all periods analyzed. It is concluded that hyaluronic acid is an alternative treatment for cases of avulsed teeth since it showed its role promoting adhesion and increased viability(AU)

Influência de diferentes tratamentos físico-químicos na adesão e viabilidade de fibroblastos de ligamento periodontal à superfície radicular simulando dentes avulsionados / Influence of different physical-chemical treatment on periodontal ligament fibroblast adhesion to root surface of simulated avulsed teeth

O reimplante tardio de dentes avulsionados é uma realidade dentro dos consultórios odontológicos. Na tentativa de se restabelecer a arquitetura e a função do ligamento periodontal, além de se evitar a anquilose, evitando ou modulando a reabsorção porsubstituição, a superfície radicular dos dentes avulsionados pode ser tratada com diversas substâncias, dentre elas o EDTA (ácido etilenodiamino tetra-acético) a 17%, sempre visando uma menor chance de ocorrer reabsorção inflamatória e por substituição. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do tratamento de discos da superfície vestibular de raízes de dentes bovinos, com EDTA 17%, com Emdogain® , com ácido hialurônico e com colágeno, através de testes de viabilidade celular, quantificação das citocinas IL-1ß, IL-6, IL-8, IL-10 eTNF-α por ensaio ELISA, além da ilustração por microscopia eletrônica de varredura da adesão dos fibroblastos sobre os discos de dentina. Foram cortados 155 discos de dentina, com 4,5 mm de diâmetro, da face vestibular da superfície radicular de dentes bovinos, previamente raspados ou não com cureta periodontal. Os discos foram regularizados, limpos e autoclavados. Os espécimes foram tratados com assubstâncias preconizadas e colocados em placas de 96 poços onde foramsemeadas células de culturas primárias de fibroblastos humanos de ligamentoperiodontal, que ficaram em contato com os discos por 48 horas. A sobrevivência e a viabilidade celular na superfície dos discos foram avaliadas através do ensaio de XTT. A microscopia eletrônica de varredura foi utilizada para verificar a adesão de fibroblastos à superfície dos discos. A detecção e quantificação das citocinas foram realizadas pelo teste ELISA. Os dados foram submetidos à análise estatística pelo teste ANOVA e Tukey (p < 0,05). Os resultados obtidos mostraram que o uso de EDTA 17% por 5 minutos sem agitação foi mais eficaz que os outros protocolos (p < 0,05) e aliado ao ácido hialurônico, ...

The delayed reimplantation of avulsed teeth is a reality in dental offices. In an attempt to restore architecture and function of the periodontal ligament,avoiding ankylosis, preventing or modulating the replacement resorption, avulsed teeth root surface may be treated with various substances including EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid) to 17%, always seeking a lower chance ofoccurring inflammatory or replacement resorption. Thus, the aim of this study was to evaluate the effectiveness of the treatment of discs cutted of the vestibular surface of bovine teeth roots with EDTA 17% with Emdogain® with hyaluronic acid and collagen through cell viability tests, quantification of cytokines IL -1ß, IL-6, IL-8, IL-10 andTNF-α by ELISA assay and, in addition, it was taken Illustrations by scanningelectron microscopy of the accession of fibroblasts on the dentin disks. 155 dentin discs with 4,5 mm in diameter will be cut from the vestibular surface of the root surface of bovine teeth, previously scraped or not with periodontal curette. The discs were regularized, cleaned and autoclaved. The specimens were treated with the substances advocated and placed in 96 well plates are seeded in which primary cell cultures of human periodontal ligament fibroblasts that were in contact with the discsfor 48 hours. The survival and cell viability on the surface of the disks are evaluated by XTT assay. The scanning electron microscopy was used to verify adherence of fibroblasts to the surface of the discs. Detection and quantification of cytokines were done by ELISA assay. The data were statistically analyzed by ANOVA and Tukey (p < 0.05). The results showed that the use of 17% EDTA for 5 minutes without stirringwas more effective than the other protocols (p <0.05) and combined with hyaluronic acid was less cytotoxic promoting better cell viability. It was not possible to ensure the fibroblasts display in scanning electron microscopy. As for the ELISA assay, there was ...

Influência de diferentes tratamentos físico-químicos na adesão e viabilidade de fibroblastos de ligamento periodontal à superfície radicular simulando dentes avulsionados / Influence of different physical-chemical treatment on periodontal ligament fibroblast adhesion to root surface of simulated avulsed teeth

O reimplante tardio de dentes avulsionados é uma realidade dentro dos consultórios odontológicos. Na tentativa de se restabelecer a arquitetura e a função do ligamento periodontal, além de se evitar a anquilose, evitando ou modulando a reabsorção porsubstituição, a superfície radicular dos dentes avulsionados pode ser tratada com diversas substâncias, dentre elas o EDTA (ácido etilenodiamino tetra-acético) a 17%, sempre visando uma menor chance de ocorrer reabsorção inflamatória e por substituição. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do tratamento de discos da superfície vestibular de raízes de dentes bovinos, com EDTA 17%, com Emdogain® , com ácido hialurônico e com colágeno, através de testes de viabilidade celular, quantificação das citocinas IL-1ß, IL-6, IL-8, IL-10 eTNF-α por ensaio ELISA, além da ilustração por microscopia eletrônica de varredura da adesão dos fibroblastos sobre os discos de dentina. Foram cortados 155 discos de dentina, com 4,5 mm de diâmetro, da face vestibular da superfície radicular de dentes bovinos, previamente raspados ou não com cureta periodontal. Os discos foram regularizados, limpos e autoclavados. Os espécimes foram tratados com assubstâncias preconizadas e colocados em placas de 96 poços onde foramsemeadas células de culturas primárias de fibroblastos humanos de ligamentoperiodontal, que ficaram em contato com os discos por 48 horas. A sobrevivência e a viabilidade celular na superfície dos discos foram avaliadas através do ensaio de XTT. A microscopia eletrônica de varredura foi utilizada para verificar a adesão de fibroblastos à superfície dos discos. A detecção e quantificação das citocinas foram realizadas pelo teste ELISA. Os dados foram submetidos à análise estatística pelo teste ANOVA e Tukey (p < 0,05). Os resultados obtidos mostraram que o uso de EDTA 17% por 5 minutos sem agitação foi mais eficaz que os outros protocolos (p < 0,05) e aliado ao ácido hialurônico...

The delayed reimplantation of avulsed teeth is a reality in dental offices. In an attempt to restore architecture and function of the periodontal ligament,avoiding ankylosis, preventing or modulating the replacement resorption, avulsed teeth root surface may be treated with various substances including EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid) to 17%, always seeking a lower chance ofoccurring inflammatory or replacement resorption. Thus, the aim of this study was to evaluate the effectiveness of the treatment of discs cutted of the vestibular surface of bovine teeth roots with EDTA 17% with Emdogain® with hyaluronic acid and collagen through cell viability tests, quantification of cytokines IL -1ß, IL-6, IL-8, IL-10 andTNF-α by ELISA assay and, in addition, it was taken Illustrations by scanningelectron microscopy of the accession of fibroblasts on the dentin disks. 155 dentin discs with 4,5 mm in diameter will be cut from the vestibular surface of the root surface of bovine teeth, previously scraped or not with periodontal curette. The discs were regularized, cleaned and autoclaved. The specimens were treated with the substances advocated and placed in 96 well plates are seeded in which primary cell cultures of human periodontal ligament fibroblasts that were in contact with the discsfor 48 hours. The survival and cell viability on the surface of the disks are evaluated by XTT assay. The scanning electron microscopy was used to verify adherence of fibroblasts to the surface of the discs. Detection and quantification of cytokines were done by ELISA assay. The data were statistically analyzed by ANOVA and Tukey (p < 0.05). The results showed that the use of 17% EDTA for 5 minutes without stirringwas more effective than the other protocols (p <0.05) and combined with hyaluronic acid was less cytotoxic promoting better cell viability. It was not possible to ensure the fibroblasts display in scanning electron microscopy. As for the ELISA assay, there was...

Análise da concentração e do ph do EDTA a 17% em função do tipo de embalagem e do tempo de armazenamento. / Analysis of concentration and ph of EDTA to 17% depending on the type of packaging and storage time

Objetivo: Este estudo teve como objetivo analisar a concentração e o pH do EDTA a 17% de três marcas comerciais e avaliar se o tipo de embalagem para armazenamento pode ocasionar uma degradação da solução ao longo do tempo. Material e Método: Para isso, a concentração das três soluções de EDTA a 17% foi medida pelo método de titulação de complexação e o pH foi aferido com o auxílio de um pHmetro. Inicialmente, se verificou a concentração e o pH das soluções contidas nos frascos originais para ver se estavam de acordo com as especificações descritas pelos fabricantes. Após, cada solução de EDTA foi disposta em frascos de vidro âmbar e de plástico leitoso. No prazo de 15, 30 e 60 dias foram retiradas seis amostras de solução de cada frasco para aferir a sua concentração, a fim de verificar se o EDTA sofreu degradação em função do tipo de embalagem em que se encontrava, sendo que novamente foi verificado o pH das mesmas. Resultados e Conclusão: Ao final do período de 60 dias, foi possível concluir que as concentrações estavam de acordo somente em duas marcas comercias e que o pH não confirmou o descrito no rótulo por nenhum das três marcas analisadas. Além disso, o EDTA a 17% não sofreu nenhuma degradação quando acondicionado em vidro âmbar ou em plástico leitoso ao longo dos 60 dias, embora o pH tenha sofrido pequenas variações ao longo de todo o período.

Objetive: This study aimed to analyze the concentration and pH of 17% EDTA three trademarks and evaluate whether the type of packaging for storage may cause a deg-radation of the solution over time. Material and Method: For this, the concentration of the three solutions of 17% EDTA was measured by titration method complexing and pH was measured with the aid of a pH meter. Initially, if there concentration and pH of the solutions contained in the bottles to see if they agreed with the specifications described by the manufacturers. After each EDTA solution was prepared in amber glass bottles and plastic milky. Within 15, 30 and 60 days samples were taken six solution of each vial to measure their concentration in order to verify if the EDTA has suffered degradation as a function of packaging material in which it was, and was again checked pH thereof. Results and Conclusion: At the end of 60 days, it was concluded that the con-centrations were in agreement in only two trademarks and confirmed that the pH is not as described on the label for any of the three brands. Furthermore, 17% EDTA did not suffer any degradation when stored in amber glass or plastic milky over 60 days, while the pH has suffered slight variations throughout the period.

Verificação de alterações estruturais do vidro quando em contato com o EDTA 17% / Verification of structural changes of glass when submitted to 17% EDTA

Introdução e objetivo: Este estudo in vitro verificou por meio de microscopia eletrônica de varredura (MEV) alterações estruturais no vidro quando em contato com o ácido etilenodiaminotetracético (EDTA). Material e métodos: A metade inferior de quatro lamínulas de vidro permaneceu submersa em EDTA 17%, pH 7,3, por diferentes tempos (7 dias, 24 horas, 6 horas e 30 minutos). Como controle, examinou-se uma amostra que ficou parcialmente imersa em água destilada por 24 horas. As amostras foram analisadas em MEV e fotografadas com magnitudes de 19, 50, 100, 200, 400, 1.000, 2.000 e 3.000 vezes. Resultados: Constatou-se que nas quatro lamínulas que estiveram em contato com o EDTA houve formação de bolhas e rachaduras no vidro, independentemente do tempo testado. A amostra controle apresentou poucos defeitos no vidro e diferenciou-se das que ficaram em contato com a substância. Conclusão: O EDTA provocou alterações na estrutura do vidro.

Introduction and objective: This in vitro study verified, through SEM, the structural changes on glass surface when submitted to EDTA. Material and methods: Samples of 4 glass coverslip remained partially (lower half of the sample) immersed in 17% EDTA pH 7.3 for different periods (7 days, 24 hours, 6 hours and 30 minutes). The samples were analyzed by SEM and photographed with x19, 50, 100, 200, 400, 1000, 2000, and 3000 magnification. Results: It was found that the four glass samples submitted to EDTA showed blisters and cracks regardless of time. The control sample showed few defects differing from those in contact with EDTA. Conclusion: EDTA led to changes in the glass structure.